产品货号:
WH0019
中文名称:
粪便基因组DNA提取试剂盒(离心吸附柱法)
英文名称:
Extraction kit for genomic DNA from faeces
产品规格:
50次
发货周期:
1~3天
产品价格:
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本试剂盒采用可以特异性结合DNA的离心吸附柱和独特沉淀系统提取粪便样本的基因组DNA。离心吸附柱中采用的硅基质材料为本公司特有新型材料,能够高效、专一吸附DNA,可最大限度去除杂质蛋白及细胞中其他有机化合物。独特沉淀剂可以有效去除样品中的杂质。提取的基因组DNA片段大,纯度高,质量稳定可靠。使用本试剂盒回收的DNA可直接用于PCR等其它分子生物学下游实验。
产品特点:
·适用范围广:适用于不同来源的固态或液态粪便样本。
·简单快速:1h内即可获得超纯的基因组DNA。
·高纯度:高效的沉淀剂去除腐殖酸等杂质,提取的DNA纯度很高,可直接用于下游实验。
试剂盒组成:
保存条件:室温(15-25℃)干燥条件下可保存12个月;更长时间的保存可置于2-8℃。
注意事项:(请务必在使用本试剂盒之前阅读此注意事项)
1.样品应避免反复冻融,否则会导致提取的DNA片段较小且提取量也下降。
2.若缓冲液SA或SC中有沉淀,可在37℃水浴中重新溶解,并摇匀后使用。
3.建议充分混匀样品,如果样品混匀不充分可能影响裂解效率,最终影响得率和比值。
4.如果样品吸水较多,可以等比例增加缓冲液SA和SC的量,如果缓冲液SA和SC不足,可单独购买。
使用方法:
使用前请先在缓冲液GD和漂洗液PW中加入无水乙醇,缓冲液GFA中加入异丙醇,加入体积请参照瓶上的标签。
1.称取粪便样本180-220mg至2 ml离心管中,并将管子置于冰上。
注意:如果是液态样本则转移200 μl至离心管中。
2.向样本中加入500 μl缓冲液SA,100 μl缓冲液SC,15 μl Proteinase K,0.25g的研磨珠间歇振荡1min至样本充分混匀或使用TGrinder H24组织研磨均质仪(OSE-TH-01)混匀(6M/S的速度振荡30s,间隔30s,共2个循环)。
3.70℃孵育15 min,孵育期间震荡2-3次。
注意:对于较难破壁的革兰氏阳性菌,可将温度提高至95℃以促进裂解。
4.涡旋15 sec,12000rpm (~13400×g )离心3 min,转移上清液至新的离心管中,加入10μl的RNase A,震荡混匀后室温放置5min。
5.加入200 μl缓冲液SH,震荡混匀,置冰上5min。
6.12000rpm (~13400×g )离心3 min。
7.将上一步所得上清液转移至新的1.5 ml离心管,加入等体积缓冲液GFA (使用前请先检查是否已加入异丙醇)。
8.将上一步所得溶液加入到一个吸附柱CR2中(吸附柱放入收集管中),12000rpm(~13400×g )离心30 sec,倒掉废液,将吸附柱CR2放入收集管中。
9.向吸附柱CR2中加入500 μl缓冲液GD (使用前请先检查是否已加入无水乙醇),12000rpm(~13400×g )离心30 sec,倒掉废液,将吸附柱CR2放入收集管中。
10.向吸附柱CR2中加入700 μl漂洗液PW (使用前请先检查是否已加入无水乙醇),12,000rpm(~13400×g )离心30 sec,倒掉废液,吸附柱CR2放入收集管中。
11.重复操作步骤10。
12.将吸附柱CR2放回收集管中,12000rpm(~13400×g)离心2 min,倒掉废液。将吸附柱CR2置于室温放置数分钟,以彻底晾干吸附材料中残余的漂洗液。
注意:这一步的目的是将吸附柱中残余的漂洗液去除,漂洗液中乙醇的残留会影响后续的酶反应(酶切、PCR等)实验。
13.将吸附柱CR2转入一个干净的离心管中,向吸附膜的中间部位悬空滴加50 μl洗脱缓冲液TB,室温放置2-5 min,12000rpm (~13400×g )离心2 min,将溶液收集到离心管中。
注意:为增加基因组DNA的得率,可将离心得到的溶液再加入吸附柱CR2中,室温放置2 min,12000rpm(~13400×g )离心2 min。洗脱液的pH值对于洗脱效率有很大影响。若用ddH2O做洗脱液应保证其pH值在7.0-8.5范围内,pH值低于7.0会降低洗脱效率;且DNA产物应保存在-20℃,以防DNA降解。
DNA浓度及纯度检测:
1.得到的基因组DNA片段的大小与样品保存时间、操作过程中的剪切力等因素有关。回收得到的DNA片段可用琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计检测浓度与纯度。
2.DNA应在OD260处有显著吸收峰,OD260值为1相当于大约50μg/ml双链DNA、40 μg/ml单链DNA。
3.OD260/OD280比值应为1.7-1.9,如果洗脱时不使用洗脱缓冲液,而使用ddH2O,比值会偏低,因为pH值和离子存在会影响光吸收值,但并不表示纯度低。
相关搜索:粪便基因组DNA提取试剂盒(离心吸附柱法),粪便gDNA提取试剂盒,Extraction kit for genomic DNA from faeces
产品特点:
·适用范围广:适用于不同来源的固态或液态粪便样本。
·简单快速:1h内即可获得超纯的基因组DNA。
·高纯度:高效的沉淀剂去除腐殖酸等杂质,提取的DNA纯度很高,可直接用于下游实验。
试剂盒组成:
组分 | 50T |
缓冲液SA | 30ml |
缓冲液SC | 5 ml |
缓冲液SH | 10 ml |
缓冲液GFA | 10 ml |
缓冲液GD | 13 ml |
漂洗液PW | 15 ml |
洗脱缓冲液TB | 15 ml |
Proteinase K | 1 ml |
RNase A(10mg/ml) | 600μl |
1mm研磨珠 | 15g |
RNase-Free吸附柱CR2 | 50个 |
收集管(2ml) | 50个 |
保存条件:室温(15-25℃)干燥条件下可保存12个月;更长时间的保存可置于2-8℃。
注意事项:(请务必在使用本试剂盒之前阅读此注意事项)
1.样品应避免反复冻融,否则会导致提取的DNA片段较小且提取量也下降。
2.若缓冲液SA或SC中有沉淀,可在37℃水浴中重新溶解,并摇匀后使用。
3.建议充分混匀样品,如果样品混匀不充分可能影响裂解效率,最终影响得率和比值。
4.如果样品吸水较多,可以等比例增加缓冲液SA和SC的量,如果缓冲液SA和SC不足,可单独购买。
使用方法:
使用前请先在缓冲液GD和漂洗液PW中加入无水乙醇,缓冲液GFA中加入异丙醇,加入体积请参照瓶上的标签。
1.称取粪便样本180-220mg至2 ml离心管中,并将管子置于冰上。
注意:如果是液态样本则转移200 μl至离心管中。
2.向样本中加入500 μl缓冲液SA,100 μl缓冲液SC,15 μl Proteinase K,0.25g的研磨珠间歇振荡1min至样本充分混匀或使用TGrinder H24组织研磨均质仪(OSE-TH-01)混匀(6M/S的速度振荡30s,间隔30s,共2个循环)。
3.70℃孵育15 min,孵育期间震荡2-3次。
注意:对于较难破壁的革兰氏阳性菌,可将温度提高至95℃以促进裂解。
4.涡旋15 sec,12000rpm (~13400×g )离心3 min,转移上清液至新的离心管中,加入10μl的RNase A,震荡混匀后室温放置5min。
5.加入200 μl缓冲液SH,震荡混匀,置冰上5min。
6.12000rpm (~13400×g )离心3 min。
7.将上一步所得上清液转移至新的1.5 ml离心管,加入等体积缓冲液GFA (使用前请先检查是否已加入异丙醇)。
8.将上一步所得溶液加入到一个吸附柱CR2中(吸附柱放入收集管中),12000rpm(~13400×g )离心30 sec,倒掉废液,将吸附柱CR2放入收集管中。
9.向吸附柱CR2中加入500 μl缓冲液GD (使用前请先检查是否已加入无水乙醇),12000rpm(~13400×g )离心30 sec,倒掉废液,将吸附柱CR2放入收集管中。
10.向吸附柱CR2中加入700 μl漂洗液PW (使用前请先检查是否已加入无水乙醇),12,000rpm(~13400×g )离心30 sec,倒掉废液,吸附柱CR2放入收集管中。
11.重复操作步骤10。
12.将吸附柱CR2放回收集管中,12000rpm(~13400×g)离心2 min,倒掉废液。将吸附柱CR2置于室温放置数分钟,以彻底晾干吸附材料中残余的漂洗液。
注意:这一步的目的是将吸附柱中残余的漂洗液去除,漂洗液中乙醇的残留会影响后续的酶反应(酶切、PCR等)实验。
13.将吸附柱CR2转入一个干净的离心管中,向吸附膜的中间部位悬空滴加50 μl洗脱缓冲液TB,室温放置2-5 min,12000rpm (~13400×g )离心2 min,将溶液收集到离心管中。
注意:为增加基因组DNA的得率,可将离心得到的溶液再加入吸附柱CR2中,室温放置2 min,12000rpm(~13400×g )离心2 min。洗脱液的pH值对于洗脱效率有很大影响。若用ddH2O做洗脱液应保证其pH值在7.0-8.5范围内,pH值低于7.0会降低洗脱效率;且DNA产物应保存在-20℃,以防DNA降解。
DNA浓度及纯度检测:
1.得到的基因组DNA片段的大小与样品保存时间、操作过程中的剪切力等因素有关。回收得到的DNA片段可用琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计检测浓度与纯度。
2.DNA应在OD260处有显著吸收峰,OD260值为1相当于大约50μg/ml双链DNA、40 μg/ml单链DNA。
3.OD260/OD280比值应为1.7-1.9,如果洗脱时不使用洗脱缓冲液,而使用ddH2O,比值会偏低,因为pH值和离子存在会影响光吸收值,但并不表示纯度低。
相关搜索:粪便基因组DNA提取试剂盒(离心吸附柱法),粪便gDNA提取试剂盒,Extraction kit for genomic DNA from faeces